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进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的HPLC检测方案

“瘦肉精”是肾上腺类神经兴奋剂,属β-兴奋剂类激素,是指能够促进瘦肉生长的药物添加剂。目前,被称为“瘦肉精”的药物添加剂主要有莱克多巴胺、盐酸克仑特罗、沙丁胺醇、硫酸沙丁胺醇、硫酸特布他林、西巴特罗、盐酸多巴胺等。
早在2002年,我国农业部、卫生部、国家食品药品监督管理局就发布公告,明令禁止在饲料和动物饮用水中添加盐酸克仑特罗和莱克多巴胺等7种“瘦肉精”。 但一些饲料加工企业及养猪饲养业主为谋取暴利,仍在饲料中添加 “瘦肉精”,前后只需1020d的时间,就可把一头普通猪催变成瘦肉型猪。如2012418日又有一则题为“利欲熏心饲料中添加瘦肉精 事情败露获刑三年”的报道。
  赛智科技应用检测部参考出入境检验检疫行业标准(SN 1116-2002-T),利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪经实践检测可提供进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的HPLC检测方案,得出的结果准确可靠,检出限好,仅供广大用户参考。
以下是进出口饲料中克伦特罗、沙丁胺醇残留量的测定的详细检测方法。

  • 1   仪器与试剂

  • 1.1 仪器

  • LC-10Tvp高效液相色谱仪

  • Vertex 色谱柱 150mm×4.6mm×5μm

  • 超声波水浴

  • Sep-Pak 真空抽滤装置,带真空泵

  • 离心机:4000r/min

  • 混匀器

  • PH

  • 1.2 试剂

  • 甲醇,色谱级。

  • 乙腈,HPLC级。

  • 正己烷。

  • 85%磷酸。

  • 盐酸溶液。

  • 氢氧化钠溶液。

  • 乙酸乙酯+正丁醇溶液(6+4),用水饱和。

  • 磷酸二氢钾。

  • 氨化甲醇。

  • 阳离子交换小柱:SUPELCLEAN LC-SCX Sep-Pak小柱。

  • 盐酸克伦特罗标准品:纯度≥99%

  • 沙丁胺醇标准品:纯度≥99%

  • 2   试样溶液的制备

  • 2.1 提取

  • 准确称取试样于离心管中,加入盐酸-甲醇溶液,于混匀器上混匀后,置超声波水浴中超声,经超声提取后冷却至室温,离心,将上清液过滤到容量瓶中,残渣用盐酸-甲醇溶液混匀提取两次,合并提取液,用盐酸-甲醇溶液洗涤滤纸并定容至刻度。

  • 2.2 净化

  • 定量取提取液于离心管中,加入正己烷,于混匀器上混匀,离心后,用尖嘴吸管将正己烷相去掉,共处理二次。再用 NaOH溶液调节PH值,用乙酸乙酯-正丁醇溶液提取样液,每次混匀2min,离心后,用尖嘴吸管将上层有机相合并到另一离心管中,在(70±5)℃下,用氮气流吹至近干,用盐酸-甲醇溶液溶解残渣。

  • 将两根SCX小柱串联好安装在真空抽滤装置上,依次用甲醇、水和L盐酸溶液处理小柱;然后将样品提取液加到小柱上;再用盐酸-甲醇溶液洗涤试管并一起转移至小柱中;依次用水、甲醇淋洗小柱。在溶剂流过固相萃取柱后,保持真空抽气状态至少保持5min

  • 于真空装置下放好刻度收集管,用氨化甲醇溶液洗脱,并收集洗脱液。将洗脱液于下,用氮气流吹至近干,用甲醇溶解残渣并定容,过滤膜后,供液相色谱测定。

  • 3   色谱条件

  • 色谱柱:Vertex 色谱柱 250mm×4.6mm×5μm

  • 流动相:乙腈+磷酸二氢钾溶液

  • 流速:1.0mL/min;

  • 温度:30℃;

  • 检测波长:215nm

  • 进样量:20μL

  • 4   标准品色谱图


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