在实验室使用高效液相色谱仪进行分离之前，必须明确建立方法的基本思路和分析目的。主要包括如下几个方面：

一、检测目的。是对部分组分的定量分析、一种组分的检出、样品中未知组分的确认或者纯化分离。

二、分离目的。是否有必要解析出样品中所有组分?

三、定量分析。准确度与精密度的具体要求是什么?

四、样品基质。可能涉及的样品基质有几种，样品的存在形态也可能相同，是否需要建立不同的方法?

五、样品量。需要分析的样品批量是多少?需要综合考虑方法的通量。

六、样品预处理方式。样品来源形成不同，预处理办法也不同。包括：

1可直接进样的溶液;

2 需稀释、加pH缓冲液、加内标或其他定容操作的溶液;

3需要首先溶解或提前处理的固体样品;

4 需预处理以除去干扰物，避免色谱柱或一起损坏样品。

七、装备与人员条件。了解高效液相色谱仪设备、人员技能、色谱柱是否恒温?HPLC系统能否进行梯度洗脱?