自1月25日新西兰牛奶中发现了有害物质（双氰胺）被曝光后，赛智科技一直关注事件发展，并积极安排对奶制品中双氰胺的高效液相色谱（HPLC)检测方案的实验。

双氰胺又名二氰二胺，缩写DICY或DCD。虽然国际标准未对食品中的双氰胺限量，但高剂量的双氰胺对人体是有毒的。

经实践检验，赛智科技全新高性能的LC-10Tvp高效液相色谱仪，可以准确检验奶制品中双氰胺的含量，方案仅供参考。

1、仪器与试剂

1.1 仪器

LC-10Tvp高效液相色谱仪

涡旋振荡器

超声波清洗机

氮吹仪

新一代双氰胺净化管

Venusil® HILIC液相色谱柱

微孔滤膜

1.2 试剂

双氰胺标准品（CAS： 461-58-5；FW=84.08）

乙酸铵、乙酸、乙腈为色谱纯

实验用水为超纯水

2、色谱条件(高效液相色谱HPLC法)

色谱柱：Venusil® HILIC（5μm，100Å，4.6*250mm）

流动相： 10mmol/L乙酸铵（pH=4.0），乙腈=15: 85；

波长：220nm

进样量：10µl

柱温：30℃

流速：0.8mL/min

3、测定原理

样品加水溶解，加乙腈超声提取，离心涡旋，经高效液相色谱仪测试 ，外标法定量。

4、实验步骤

称取1g试样于50mL具塞离心管中，加2mL水，涡旋30s，加2ml乙腈涡旋30s。再往现有的提取液中加2mL乙腈，重复上述提取步骤。再将该提取步骤重复2次，得到共计约10mL的提取液。以4000r/min离心5min，将全部上清液加入新一代双氰胺净化管中（500mg/15mL），将MAS管上下晃动30s，然后涡旋30s，8000r/min离心5min，取全部上清液（约10ml）于玻璃试管中，50℃下氮气吹干，加入1ml乙腈复溶，过0.22μm微孔滤膜，待测。

注：1. 做基质加标实验时的标准溶液建议选择以水为溶剂，防止加标瞬间发生蛋白沉淀；

2. 乙腈提取分4次，为防止乙腈体积过多时沉淀蛋白速度过快，影响提取效果。

5、色图谱