蜂王浆中10-羟基-2-癸烯酸的HPLC测定

10-羟基-2-癸烯酸又称王浆酸。是从蜂王浆中分离出一种特殊的不饱和有机酸,是蜂王浆质量的重要指标之一,一般含量在1.4%~2.4%之间,约占总脂肪酸的50%以上。分离出的纯王浆酸呈白色晶体,在新鲜的蜂王浆中多以游离形式存在,性质比较稳定,有很好的杀菌、抑菌作用和抗癌、抗放射的功能。10-羟基-Δ2-癸烯酸对保护王浆中的活性物质有重要的意义而且大大提高了蜂王浆的保健和医疗的效用。

仪器设备:

LC-10T高效液相色谱仪:配紫外检测器

分析天平:感量分别为0.01mg、0.0001g 和0.001g。

离心机:转速≥3000r/min。

超声波清洗器:功率 250W,频率33kHz。

色谱条件:

色谱柱: C18  250mm*4.6mm 5µm

流动相:甲醇+水+磷酸

流速: 1.0mL/min

柱温:35℃

检测波长:210nm

进样量:10µl

本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T 6682规定的一级水试剂

磷酸

盐酸:含量:36%~38%

甲醇:色谱纯

无水乙醇

硅藻土:化学纯,粒径范围:0.2~0.8mm。

试样经乙醇或甲醇提取后,用高效液相色谱进行测定,以保留时间定性,峰面积外标法定量。

标准溶液的配制:

10-羟基-2-癸烯酸标准储备液:称取10mg(准确至0.01mg)10-羟基-2-癸烯酸标准品于10mL容量瓶中,用无水乙醇溶解并定容至刻度,摇匀。此溶液浓度为1.0 mg/mL。

10-羟基-2-癸烯酸标准系列工作液:分别准确吸取10-羟基-2-癸烯酸标准储备液0.02mL、0.10mL、0.20mL、0.50mL、1.00mL于 10.0mL容量瓶中,用无水乙醇稀释至刻度,摇匀,得浓度分别为2.0ug/mL、10.0ug/mL、20.0ug/mL、50.0ug/mL、100ug/mL的标准系列工作液。

盐酸溶液(0.01mol/L):准确吸取盐酸0.9mL,缓慢加入1000mL水,混匀。微孔滤膜:0.45um,有机相。

色谱图


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