
高效液相色谱仪的分离方式
高效液相色谱仪中包括多种分离方式。从不同的角度出发,可以得到不同的分类结果。按色谱过程的分离机制,可将液相色谱法分为吸附色谱、分配色谱、空间排阻色谱、离子交换色谱及亲和色谱等类别。根据流动性与固定相极性的差别,也可分为正相色谱和反向色谱两种模式。流动性极性大于固定相极性时,称为反向色谱;反之,称为正相色谱。
吸附色谱法:固定相为吸附剂,靠组分在吸附剂上吸附系数的差别而达到分离目的。
分配色谱法:高效液相色谱中最常用的模式,付定向为液态,利用样品组分在固定相与流动相中的溶解度不同所产生的的分配系数差别而达到分离的目的。
空间排阻色谱法:采用凝胶作为固定相,依样品组分的分子尺寸与凝胶孔径间的关系即渗透系数的差别而分离。
离子交换色谱法:采用离子交换树脂作为固定相,依样品离子与固定相表面离子交换基团的交换能力的差别而分离。
亲和色谱法:将具有生物活性的配基键合到载体或基质表面上形成固定相,利用蛋白质或生物大分子与固定相表面上配基的专属亲和力进行分离。
化学键合相色谱法:将固定相的官能团键合在载体表面,所形成的固定相称为化学键合相。反向键合相色谱是目前应用最为广泛的液相色谱仪分离法之一。
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