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维生素D2和D3都具有促进钙的生长和沉积的作用，但是化学结构不同，维生素d2是骨化醇，而维生素d3为胆固化醇。

维生素D2的主要用于一些维生素D缺乏症的治疗与预防, 维生素D3主要是可以维持血液中的柠檬酸盐在正常水平和防止氨基酸损失。

1、仪器设备

LC-10T高效液相色谱仪-多维自动阀切液相

2、色谱条件

色谱柱：

一维C8 色谱柱，150* 4.6* 5.0

二维PAH C18色谱柱，150* 4.6*3.0

柱温：35 度

流动相：

一维流动相 A相水 B相乙腈-甲醇 

二维流动相 A相，乙腈水溶液，

               B相，甲醇，95%A等度

检测波长：264nm

进样量：20ul

3、标准品配置

维生素D2标准储备溶液（1000mg/l） ：准确称取50mg（精确到0.1mg）维生素D2标准品于小烧杯，用无水乙醇溶解并转移至50ml容量瓶，定容至刻度，摇匀。

维生素D3标准储备溶液（1000mg/l） ：准确称取50mg（精确到0.1mg）维生素D3标准品于小烧杯，用无水乙醇溶解并转移至50ml容量瓶，定容至刻度，摇匀。

维生素D2和维生素D3混合标准溶液中间液：分别吸取1.00ml维生素D2标准储备溶液和1.00ml维生素D3标准储备溶液于同一100ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀。

维生素D2和维生素D3混合标准溶液使用液（1.0mg/l）:吸取10.00ml 维生素D2和维生素D3混合标准溶液中间液（10.0mg/l）用100m容量瓶中，用甲醇定容至刻度，混匀。

4、标准品图谱